存活素反义寡脱氧核苷酸对人恶性黑色素瘤细胞增殖和凋亡的影响

• 作者: 冯永强 曹永倩 李强 王一兵 王法刚 蔡景龙 霍然
• 来源期刊: 中华烧伤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 寡核苷酸类,反义 黑色素瘤 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 存活素
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 128-132
• 页数: 5页
• 分类号: R9
• 字数: 4044字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2010.02.013

摘要

目的 了解存活素反义寡脱氧核苷酸(ASODN)对人恶性黑色素瘤细胞(hMMC)增殖和凋亡的影响.方法 取对数生长期hMMC株A375,按随机数字表法分为对照组(不转染)、正义链组(转染600 nmol/L存活素正义寡脱氧核苷酸)、错义链组(转染600 nmol/L存活素错义寡脱氧核苷酸)、脂质体组(仅用脂质体处理)、反义链组(转染存活素ASODN,根据转染物浓度再分为200、400、600 nmol/L 3个亚组),倒置荧光显微镜下观察转染效果.采用噻唑蓝法测定细胞存活情况并计算细胞增殖抑制率,双变量流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期,蛋白质印迹法检测存活素蛋白的表达,激酶法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)的活性.对数据进行方差分析.结果 (1)正义链组、错义链组、反义链600 nmol/L组细胞转染率均大于80%.(2)反义链200、400、600nmol/L组转染后24 h细胞增殖抑制率[(10.30±0.56)%、(16.69±0.58)%、(24.67±0.67)%]较正义链组[(5.23±0.25)%]、错义链组[(5.09±0.13)%]、脂质体组[(4.70±0.45)%]显著增加(F=746.91,P值均小于0.05),且随转染时间延长,增殖抑制率增加明显.(3)反义链200、400、600nmol/L组转染后24 h细胞凋亡率分别为(13.5±1.9)%、(20.1±1.5)%、(32.1±2.9)%,显著高于对照组、正义链组、错义链组、脂质体组的(6.5±0.6)%、(5.6±0.7)%、(6.4±1.0)%、(6.5±1.3)%(F=139.9,P值均小于0.05),细胞被阻滞在G2/M期.(4)与对照组比较,反义链各浓度组存活素蛋白表达量减少,caspase-3活性明显增高(F=63.1,P值均小于0.05);正义链组、错义链组、脂质体组caspase-3活性与对照组比较,差异无统计学意义(F=0.512,P值均大于0.05).结论 存活素ASODN能够呈浓度-时间依赖性抑制hMMC株A375增殖,诱导G2/M期阻滞,促进其凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蔡景龙	中国医学科学院整形外科医院十六科	33	199	8.0	12.0
2	霍然	山东大学附属省立医院烧伤整形科	63	365	10.0	16.0
3	冯永强	山东大学附属省立医院烧伤整形科	41	189	7.0	10.0
4	王一兵	山东大学附属省立医院烧伤整形科	44	289	10.0	14.0
5	李强	山东大学附属省立医院烧伤整形科	56	386	11.0	16.0
6	曹永倩	山东大学附属省立医院烧伤整形科	11	22	3.0	4.0
7	王法刚	山东大学附属省立医院烧伤整形科	8	12	2.0	3.0