哺乳动物细胞CDK3系列表达载体的构建与表达

• 作者: 吴健谊 李恩民 蒋太峰 许丽艳 谢剑君
• 来源期刊: 汕头大学医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: CDK3 基因克隆 真核表达载体
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 页码范围: 134-137,封4
• 分类号: Q71|R73-3
• 字数: 3422字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建一系列细胞周期蛋白依赖激酶3(CDK3)在哺乳动物细胞的表达载体,并在真核细胞NIH3T3中进行初步表达.方法:从食管癌细胞中提取总RNA,RT-PCR扩增CDK3编码区,然后将PCR产物克隆到T载体;扩增后的CDK3片段分别亚克隆入pcDNA3-4、pNTAP和pEGFP等4种哺乳动物表达载体;将获得的表达载体转染小鼠成纤维细胞NIH3T3,并用蛋白免疫印迹法进行初步的CDK3表达分析.结果:PCR扩增获得约900 bp目的片段,经T载体克隆和DNA序列分析显示重组片段是人CDK3基因序列,全长915 bp;CDK3目的片段分别亚克隆入pcDNA3-4、pNTAP和pEGFP载体,获得相应表达载体;运用构建的表达载体,可以在真核细胞中表达出CDK3蛋白.结论:成功构建了CDK3系列哺乳动物细胞表达载体,并在NIH3T3中得到表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许丽艳	汕头大学医学院病理学教研室	76	528	13.0	19.0
2	李恩民	汕头大学医学院生物化学教研室	77	510	12.0	18.0
3	吴健谊	汕头大学医学院生物化学教研室	16	106	5.0	10.0
7	蒋太峰	汕头大学医学院生物化学教研室	3	4	1.0	2.0
11	谢剑君	汕头大学医学院生物化学教研室	5	13	3.0	3.0