原发性开角型青光眼致病基因小鼠MYOC Pro356Leu突变型质粒构建及鉴定

• 作者: 卓业鸿 孙雪荣 李春梅 祁影 葛坚 陈梦飞
• 来源期刊: 眼科学报
• 学科: 医学
• 关键词: 原发性开角型青光眼 MYOC Pro356Leu突变 质粒构建
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 页码范围: 57-61
• 分类号: R77
• 字数: 3563字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4432.2010.01.015

摘要

目的:构建小鼠MYOC Pro356Leu突变型质粒及鉴定.方法:1.将含有红重组酶基因的质粒pKD46电击入RP23-180F15 BAC克隆.2.利用PCR扩增pStart-K载体,将PCR产物电穿孔入RP23-180F15 BAC红色重组细菌的MYOC基因组片段.3.PCR扩增mMyoc Afe Ⅰ片段,亚克隆mMyoc Afe Ⅰ片段进入pBluescript载体.4.设计两条寡核苷酸将Pro356Leu(C to T at codon 356)导入pBS_mMyoc Afe Ⅰ克隆.5.通过酶切及连接酶反应将pBS_mMyoc Affe Ⅰ mut clone导入pStart-K_mMyoc构建成pStart-K_mMyoc mut克隆.结果:成功构建小鼠MYOC Pro356Leu突变型质粒pStart-K_mMyoc mut克隆,并经酶切及测序证实.结论:应用红重组技术及pStart-K载体克隆大片段DNA是有效的DNA克隆方法,我们所构建的MYOC Pro356Leu突变型质粒将为研究MYOC基因在原发性开角型青光眼发病中的功能和作用提供实验依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卓业鸿	中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室	33	148	7.0	10.0
2	葛坚	中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室	105	969	16.0	25.0
3	孙雪荣	中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室	2	32	1.0	2.0
4	李春梅	中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室	10	23	2.0	4.0
5	陈梦飞	中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室	2	0	0.0	0.0
6	祁影	中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室	1	0	0.0	0.0