靶向性血小板衍生生长因子siRNA对肝星状细胞增殖的影响

• 作者: 卢放根 吴福全 李发武 王文琦
• 来源期刊: 临床和实验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 血小板衍生生长因子 小干扰RNA 肝星状细胞 基因治疗
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 643-645,648
• 页数: 4页
• 分类号: R5
• 字数: 3227字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-4695.2010.09.002

摘要

目的 探讨小干扰RNA(siRNA)降低血小板衍生生长因子B链(PDGF-B)基因对肝星状细胞(HSCs)增殖与细胞外基质表达的影响.方法 构建PDGF-B 靶向siRNA重组表达质粒pSilencer3.l-Hlhygro-PDGF-B siRNA,将重组质粒转染HSCs细胞,噻唑蓝(MTT)法测定转染后12 h、24 h、36 h、48 h、60 h的增殖抑制率;半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)与免疫印迹检测转染后36 h HSCs细胞PDGF-B表达.放免法检测HSCs细胞株上清液中透明质酸和Ⅲ型前胶原的表达.结果 经酶切鉴定和测序结果证实PDGF-B靶向siRNA重组表达载体构建成功,转染重组质粒36 h后,PDGF-B siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3干预组的HSCs增殖抑制率明显高于对照质粒转染组(34.04%、14.89%、25.53% VS 3.19%;均 P<0.01～0.05);RT-PCR和免疫印迹显示:各siRNA表达质粒阳性HSCs细胞PDGF-B mRNA和蛋白表达明显降低,与空脂质体组及对照质粒组比较,差异具有统计学意义(均P<0.05),放免法显示:siRNAs干预组HSCs细胞透明质酸和Ⅲ型前胶原表达明显降低,与空脂质体组及对照质粒组比较,差异具有统计学意义(均P<0.05).结论 靶向PDGF-B链的siRNA可降低HSCs的PDGF-B基因表达,具有抑制HSCs增殖和分泌细胞外基质的能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢放根	中南大学湘雅二医院消化科	122	635	12.0	19.0
2	王文琦	东莞市人民医院感染病科	5	8	2.0	2.0
3	吴福全	东莞市人民医院感染病科	6	34	3.0	5.0
4	李发武	东莞市人民医院感染病科	9	79	3.0	8.0