多聚胞嘧啶结合蛋白E2的RNA干扰对白血病32DP210细胞分化影响的分子机制探讨

• 作者: 单万水 张文萍 杨燕 陈荣贵 韩红星
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 白血病,粒-单核细胞,慢性 RNA干扰 细胞分化 多聚胞嘧啶结合蛋白E2 CCAAT增强子结合蛋白α
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 472-476
• 分类号: R733.7
• 字数: 4630字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2010.06.003

摘要

目的:Bcr/abl诱导多聚胞嘧啶结合蛋白E2 [poly(rC)-binding protein-E2,hnRNP-E2]的异常表达在慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)急变中起着重要作用.本研究旨在探讨hnRNP-E2特异性小发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)对小鼠白血病32DP210细胞分化的影响,并初步探讨其可能的分子机制.方法:构建能表达特异性抑制小鼠hnRNP-E2基因表达的shRNA(即sh-hnRNP-E2)反转录病毒载体,经Phoenix-Ampho细胞包装后, 取上清液感染小鼠白血病32DP210细胞, 然后采用RT-PCR和Western 印迹法验证sh-hnRNP-E2对hnRNP-E2 mRNA的干扰以及蛋白表达抑制效果,瑞氏染色法观察靶细胞分化情况,FCM法检测粒系分化抗原Gr-1表达情况,Western印迹法检测下游野生型CCAAT增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer-binding protein α,C/EBPα)的表达情况.结果:sh-hnRNP-E2反转录病毒感染32DP210细胞后,显著抑制靶细胞内hnRNP-E2 mRNA和蛋白的表达;靶细胞形态学出现粒系分化特征,细胞表面粒系分化抗原Gr-1表达被诱导;同时,靶细胞内野生型C/EBPα蛋白的表达恢复.结论:sh-hnRNP-E2特异性沉默靶细胞内hnRNP-E2基因表达后,可促进32DP210细胞向粒系分化;其机制可能与hnRNP-E2表达受抑制后,不能再对C/EBPα的翻译模式进行异常调控,从而恢复野生型C/EBPα的表达有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	单万水	深圳市第三人民医院检验科	22	149	6.0	11.0
2	杨燕	深圳市第三人民医院检验科	10	30	3.0	5.0
3	张文萍	深圳市第三人民医院检验科	6	15	2.0	3.0
4	韩红星	深圳市第三人民医院检验科	7	39	3.0	6.0
5	陈荣贵	深圳市观澜人民医院检验科	2	3	1.0	1.0