表达siRNA的重组腺相关病毒载体的构建和鉴定

• 作者: 李厚达 殷俊
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 农学
• 关键词: RNA干扰 H1启动子 腺相关病毒
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 216-222
• 页数: 7页
• 分类号: S858.28|S852.65
• 语种: 中文

摘要

腺相关病毒(AAV)载体介导的RNA干扰(RNAi)可在哺乳动物细胞中长期特异性抑制同源基因表达.本研究以AAV Helper-Free System中的转移质粒pAAV-MCS为基础,引入增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因和H1启动子,将该质粒改造为可表达小干扰RNA(siRNA)和EGFP的质粒pAAV-EGFP-H1.该质粒与辅助质粒共转染包装细胞后,获得了具有感染性的重组AAV(rAAV).以EGFP为靶基因的干扰实验证明;所得rAAV可以产生siRNA并能够特异性抑制EGFP靶基因表达;荧光显微镜观察、FACS分析和Real-timePCR方法均表明重组病毒rAAv-H1-shEGFP引起EGFP的表达降低大于60%.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李厚达		89	740	16.0	21.0
2	殷俊		34	164	9.0	11.0