修饰脂肪酶催化水解反应的动力学和热力学研究

• 作者: 刘小平 熊亚红 苏健鸿
• 来源期刊: 分子催化
• 学科: 化学
• 关键词: 脂肪酶 化学修饰 稳定性 动力学 热力学参数
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 435-442
• 分类号: Q55|O643.32
• 语种: 中文

摘要

采用邻苯二甲酸酐(PA)对猪胰脂肪酶(PPL)进行了化学修饰,以三硝基苯磺酸法测定修饰酶的平均氨基修饰度,并比较了酶修饰前后的紫外光谱和荧光光谱;采用动力学方法考察了酸碱和热对修饰酶水解活性和稳定性的影响,并计算了一系列动力学和热力学参数.实验结果表明:PA对PPL的修饰度为30%,脂肪酶PPL经PA修饰后,其紫外特征吸收峰发生红移,吸收强度降低,而且最大荧光发射峰发生蓝移,荧光强度增大;PPL经PA修饰前后,催化水解反应的最适pH和最适温度未发生变化,仍为pH7.5和40 ℃,但修饰后酶催化水解的效率和酶与底物的亲和力得到有效提高,反应的活化能Ea、自由能ΔG≠、活化焓ΔH≠及活化熵ΔS≠均明显降低,如最适条件下修饰酶PA-PPL和脂肪酶PPL的转化数kcat和反应的活化能Ea分别为39.8 s-1、25.8 kJ/mol和34.4s-1、43.8 kJ/mol;PPL经PA修饰后,酶分子热变性的热力学参数(变性活化能Ea,d、变性自由能ΔG≠d、变性活化焓ΔH≠d及变性活化熵ΔS≠d)均增大,半衰期t1/2延长,酶分子的热稳定性也得到有效提高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘小平	华南农业大学理学院生物材料研究所	21	162	9.0	12.0
2	熊亚红	华南农业大学理学院生物材料研究所	25	272	7.0	16.0
3	苏健鸿	华南农业大学理学院生物材料研究所	3	27	3.0	3.0