CLSM观察大鼠局灶性脑缺血半暗区小胶质细胞的变化及意义

• 作者: 李泽宜 李雪梅 牛文泽 王果 陈翔 韩书珍
• 来源期刊: 中风与神经疾病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脑缺血/再灌注损伤 罗丹明6G TTC MDA 脑含水量 FITC-ILB4 激光扫描共聚焦显微镜 单核细胞 小胶质细胞 半暗区
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 399-403
• 页数: 5页
• 分类号: R743.3
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨用激光扫描共聚焦显微镜(Confocal Laser Scanning Microscope,CLSM)观察局灶性大鼠脑缺血半暗区小胶质细胞的变化及其意义.方法 采用改良线栓法建立大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型.动物随机分为假手术组(S组)、模型组(M组).M组又分为再灌注6h、24h、48h、72h、7d组5小组,共6小组.在制作MCAO模型时和制作后的12h经尾静脉各注射一次罗丹明6G(Rhod 6G).各组动物麻醉清醒后及处死前均给予神经行为学评分.每组大鼠随机1只用于TIC染色观察脑梗死灶,6只测脑组织丙二醛(MDA)含量与含水量,6只用于凝集素荧光(FITC-ILB4)组化染色激光扫描共聚焦显微镜(Confocal Laser Scanning Microscope,CLSM)观察浸润的单核细胞及半暗区小胶质细胞(microglia MG)形态及数量等的变化情况.结果 M组出现不同程度的神经行为学评分异常;TTC染色示M组出现白色梗死灶;M组MDA含量较S组均有升高(P<0.01),M72h组明显高于M6h、M24h和M7d组,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05);与S组比较,M组脑含水量在6h时即明显升高,72h时达到高峰(P<0.01),7d时两组大鼠的脑含水量基本恢复正常,与s组相比无明显差异(P>0.05).CLSM观察M6h组半暗区周围出现ILIM阳性(ILB4+)细胞即分枝状小胶质细胞(Rhod 6G-)和浸润的单核细胞(Rhod 6G+),48h明显增多形态向阿米巴样转变,72h达到高峰,主要为脑源性小胶质细胞增生,形态以阿米巴样为主,7d下降;M组MDA含量与半暗区ILB4+细胞数量呈正相关(r=0.631,P<0.01).结论 急性缺血/再灌注脑损伤的发生可能与半暗区小胶质细胞的过度活化有关.