先天性肾上腺皮质增生症基因突变位点诊断方法的建立

• 作者: 余永国 傅启华 沈永年 王剑 郁婷婷 黄晓东
• 来源期刊: 中华检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肾上腺增生,先天性 类固醇21-羟化酶 类固醇17-α-羟化酶 突变
• 年，卷（期）: 2010,（7）
• 所属期刊栏目: 临床实验诊断研究
• 页码范围: 606-610
• 分类号: R5
• 字数: 4160字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2010.07.006

摘要

目的 利用PCR产物直接测序、SNP位点分析和T-A克隆技术,建立先天性肾上腺皮质增生症的基因突变位点诊断方法.方法 收集临床诊断为21-羟化酶缺乏症(21-OHD)患者33例和17α-羟化酶缺乏症(17-OHD)患者2例及所有患者父母的外周血标本,以及105名健康对照者外周血标本.抽提外周血基因组DNA.根据CYP21A2基因与其假基因间的基因序列差异设计高特异性的PCR引物,扩增CYP21A2基因全长,通过PCR产物直接测序、SNP位点分析以及PCR产物T-A克隆分析检测CYP21A2基因突变.采用PCR扩增结合直接测序的方法进行CYP17A1基因突变的检测.结果 应用本研究建立的方法,可以对所有患者的基因突变进行诊断.33例21-OHD患者中,共发现13种不同形式的CYP21A2基因突变,其中IVS2-13A/C>G、p. I172N和融合基因分别占32%(21/66)、27%(18/66)和15%(10/66).91% CYP21A2基因突变源自于相应的假基因.2例17-OHD患者分别为CYP17A1基因IVS4-6A>G纯合突变及CYP17A1基因p.487_489del纯合突变.所有患者基因突变均来自父母.健康对照者均未检测出基因突变.结论 本研究建立了先天性肾上腺皮质增生症基因突变位点的诊断方法,为临床提供了可靠的确诊依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	傅启华	上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心检验科	66	367	10.0	15.0
2	王剑	上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心检验科	67	209	8.0	9.0
3	郁婷婷	上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心检验科	9	22	2.0	4.0
4	黄晓东	上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心内分泌科	19	118	6.0	10.0
5	余永国	上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心内分泌科	11	34	4.0	5.0
6	沈永年	上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心内分泌科	10	55	4.0	7.0