重组人血管内皮抑素的阳离子交换色谱复性与纯化条件研究

• 作者: 储平 戴清源 李婉珍 李朝军 陈涛
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 重组人血管内皮抑素 色谱复性 阳离子交换色谱
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 117-120
• 页数: 4页
• 分类号: Q51
• 语种: 中文

摘要

对rhEndostatin包涵体蛋白的色谱复性条件进行研究,摸索出最佳的复性、纯化条件,解决其在大肠杆菌中表达提取时遇到的蛋白变性问题.按实验条件对表达的rhEndostatin包涵体蛋白进行提取、洗涤、变性;利用正交法设计重组蛋白的色谱复性、纯化实验;利用SP-Sepharose Fast Flow阳离子交换柱对rhEndostatin包涵体蛋白进行了色谱复性、纯化.最佳复性条件为rhEndostatin上样浓度为2.5 mg/mL,洗脱体积流量为1/20床体积/min(3.5 mL/min),NaCl浓度0.1 mol/L,GSH/GSSG的浓度比为3/0.3 mmol/L.在此条件下纯度约97%,蛋白回收率为90%,重组蛋白的活性最高,IG50达到5 μg/mL.