蓝粒小麦4Ag染色体的显微分离与鉴定

• 作者: 任亮 尚勋武 李振声 李滨 王化俊 郑琪
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 蓝粒小麦 4Ag染色体 显微分离 原位杂交
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1031-1037
• 分类号: S5
• 字数: 5975字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2010.06.001

摘要

本研究采用显微分离技术从蓝粒小麦(Triticum aestivum L.(2n=6x=42)×Thinopyrum ponticum Liu &Wang(2n=10x=70))根尖细胞中期分裂相中分离出具有4Ag染色体形态特征的单条染色体,对分离后的细胞进行原位杂交(FISH),结果显示细胞中所剩的和显微分离到的单条染色体均为4Ag染色体.利用Sau3A接头介导的PCR方法对分离出的单条4Ag染色体进行体外扩增,扩增的DNA片段大小约为200～2 000 bp,主要集中在250～750 bp之间.以DIG-dUTP标记的蓝粒基因组DNA为探针,与该扩增产物进行Southern杂交,结果表明显微分离出的染色体得到了有效的扩增.利用该分离染色体的PCR扩增产物为探针,对蓝粒小麦进行原位杂交,证明显微分离的染色体体外扩增片段确实来源于4Ag染色体.本研究拓宽了染色体显微分离的范围,为构建4Ag染色体文库和克隆位于该染色体上的重要农艺性状基因提供了新途径.