人VEGF165基因转染成人成肌细胞的实验研究

• 作者: 周建大 李万猛 李文波 李明 殷照初 邹永华 陈勇 陈孜孜
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 医学
• 关键词: 骨骼肌 成肌细胞 血管内皮生长因子 基因表达
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 68-73
• 页数: 6页
• 分类号: R394-33
• 字数: 5081字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2010.01.013

摘要

目的:将人血管内皮生长因子165(hVEGF165)导入原代离体成肌细胞,观察该细胞hVEGF分泌情况,探讨成人自体转基因成肌细胞移植的可行性.方法:采用两步消化法对成人骨骼肌组织消化获取相对较纯的成肌细胞,通过差速贴壁法进行进一步的纯化.以脂质体转染法将pcDNA3.1-hVEGF165导入成肌细胞,通过RT-PCR、ELISA和Western-blot进行hVEGF165定量检测,MTT测定和Mile's实验检测VEGF165的生物学活性.结果:转基因细胞经RT-PCR扩增出一条VEGF的特异性泳带,ELISA显示转基因细胞培养上清VEGF浓度分别达到18.92±1.77 ng/mL、19.04±2.15 ng/mL,Western blot检测转基因成肌细胞上清均检测到VEGF蛋白特异性的杂交带,MTT显示转基因细胞上清明显促内皮细胞增殖,Mile's实验显示转基因细胞上清明显增加毛细血管通透性.结论:质粒pcDNA3.1-hVEGF165能成功转入成人成肌细胞,转基因细胞能分泌有生物活性的VEGF165蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周建大	中南大学湘雅三医院整形烧伤外科	82	453	10.0	17.0
2	李明	中南大学湘雅三医院整形烧伤外科	70	400	13.0	17.0
3	陈勇		22	20	2.0	3.0
4	邹永华		11	35	2.0	5.0
5	殷照初		11	12	2.0	3.0
6	李文波	中南大学湘雅三医院整形烧伤外科	13	80	3.0	8.0
7	陈孜孜	中南大学湘雅三医院整形烧伤外科	5	7	1.0	2.0