根癌农杆菌介导的橡胶树花药愈伤组织遗传转化体系的建立

• 作者: 华玉伟 周权男 孙爱花 李哲 黄华孙 黄天带
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 橡胶树 根癌农杆菌 花药愈伤组织 遗传转化 次生体胚发生
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 页码范围: 1691-1697
• 分类号: S5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2010.01691

摘要

为建立根癌农杆菌介导的橡胶树遗传转化体系,以花药愈伤组织为受体,研究了农杆菌菌株、共培养温度、共培养时间、乙酰丁香酮(AS)等因素对遗传转化效率的影响.结果表明,农杆菌菌株、共培养温度和共培养时间对转化效率具有显著影响,AS不影响转化效率.2.2万个花药愈伤组织经EHA105菌株侵染后,转入未添加AS的培养基,22℃共培养6 d,通过50 mg L-1卡那霉素抗性筛选、叶片GUS染色、uidA和Npt Ⅱ基因PCR特异扩增、PCR产物测序及Npt Ⅱ基因Southern检测,鉴定出11株转基因植株,并通过嫁接和次生体胚发生,获得来自8个转基因株系的681株转基因植株,移栽成活253株.