苹果IRAP反应体系的建立和指纹图谱构建

• 作者: 周军永 孙俊 孙其宝 王昆
• 来源期刊: 安徽农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 苹果 逆转座子 IRAP-PCR 指纹图谱
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 页码范围: 558-563
• 分类号: S661.1
• 语种: 中文

摘要

利用已获得的苹果Ty1-copia类逆转座子LTRs建立了苹果逆转座子间扩增多态性(IRAP)技术体系,对影响IRAP-PCR扩增结果的若干因子进行了研究.优化的反应体系包含:2.5 μL 10×buffer,50 ng模板DNA,2.5 mmol·L-1 Mg2+,0.2 mmol·L-1 dNTPs,0.4 μmol·L-1引物,1 U Taq DNA聚合酶,反应体积为25 μL;优化的PCR扩增程序为:94℃ 2 min; 94℃ 1 min,退火1 min,72℃ 2 min,循环35次;72℃延伸10 min;退火温度根据引物温度设定.该IRAP体系分别用于‘元帅'和‘富士'的短枝和着色芽变指纹图谱的分析,构建的指纹图谱可以作为芽变鉴定的依据,表明这些突变可能系逆转座子转座插入或逆转座子间重组所致.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙俊	安徽农业大学园艺学院	67	660	15.0	22.0
2	孙其宝	安徽省农业科学院园艺研究所	91	573	13.0	19.0
3	周军永	安徽农业大学园艺学院	3	16	2.0	3.0