假臭草DNA提取及RAPD反应体系的优化

• 作者: 易晓洁 李传军 杨礼富 王孝钢 王真辉 袁坤 陈秋波
• 来源期刊: 热带农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 假臭草 DNA提取 RAPD 体系优化
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 21-25
• 分类号: S451
• 字数: 3833字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-2196.2010.05.007

摘要

以假臭草叶片为材料,对影响其随机扩增多态DNA(RAPD)反应的各因素进行优化,建立了假臭草RAPD的优化反应体系和程序,即在10μL反应体系中,5ng(/10μL)模板DNA,1.0 μmol/L随机引物F15,150μmol/LdNTPs,2.0mol/LMg2+,1.0UTaq DNA聚合酶;扩增程序为95℃预变性4min,95℃变性40 S,36℃退火40 s,72℃延伸1 min,10个循环,后94℃变性30 s,35℃退火30 s,72℃延伸1 min,35个循环,72℃延伸5 min,4℃保温.