团头鲂β-actin启动子在家蚕中活性分析

• 作者: 周阳 曹广力 薛仁宇 贡成良 郭学双
• 来源期刊: 江苏蚕业
• 学科: 农学
• 关键词: 团头鲂β-actin启动子 giggyBac转座子 转基因 家蚕 精子介导法
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 页码范围: 1-5
• 分类号: S881
• 字数: 4112字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-9848.2010.02.001

摘要

利用双式荧光报告基因检测团头鲂β-actin启动子在家蚕BmN细胞和在家蚕体内的活性.通过脂质体介导法将转基因载体pigA3GFPAβdsRed和辅助质粒(1:3)混合均匀后转染BmN细胞,48 h后,可以检测到同时发绿色荧光和红色荧光的家蚕细胞,表明来自团头鲂的β-actin启动子在家蚕BmN细胞具有活性,能驱动DsRed基因在家蚕BmN细胞中表达.以gfp、dsred的特异引物,可从pigA3GFPAβdsRed转化家蚕BmN细胞基因组内扩增出gfp、dsred相应大小的片段,提示外源基因已经插入到细胞基因组中.随着转化细胞的传代,绿色荧光稳定存在,而红色荧光会逐渐减弱直至检测不到,暗示β-actin启动子在家蚕细胞中容易受到家蚕BmN细胞因子的影响而活性减弱.将转基因载体pigA3GFPAβdsRed和辅助质粒(1:3)利用精子介导法导人家蚕受精卵,7天后,在部分受精卵中可观察到绿色荧光和红色荧光,进一步证明了β-actin启动子在家蚕体内具有活性.结果显示,含双式荧光报告基因的转基因载体为鉴定β-actin启动子等外源启动子在家蚕中的活性提供了快捷准确的鉴定方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	薛仁宇	苏州大学基础医学与生物科学学院	110	944	17.0	24.0
2	贡成良	苏州大学基础医学与生物科学学院	136	1227	19.0	27.0
3	曹广力	苏州大学基础医学与生物科学学院	136	1198	19.0	28.0
4	郭学双	苏州大学基础医学与生物科学学院	3	9	1.0	3.0
5	周阳	苏州大学基础医学与生物科学学院	2	2	1.0	1.0