家蚕吡哆醛激酶的融合表达与纯化

• 作者: 张剑韵 张平平 黄龙全
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 家蚕 吡哆醛激酶 融合表达 纯化 酶活性
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 页码范围: 957-961
• 分类号: Q966
• 语种: 中文

摘要

[目的]吡哆醛激酶(pyridoxal kinase,PLK,EC 2.7.1.35)是维生素B6的关键代谢酶.本研究原核表达家蚕Bombyx mori/重组PLK,为进一步开展家蚕PLK的催化作用机制和表达调控机制的研究奠定基础.[方法]构建家蚕PLK基因融合表达质粒,转化大肠杆菌Escherichia coli诱导表达,经Ni2+亲和层析纯化后,对融合蛋白的催化活性进行分析.[结果]纯化后的家蚕重组PLK经SDS-PAGE鉴定为单一条带,比活力为1 800 U/mg,纯化倍数为40倍.在底物过菌的条件下,该重组酶的体外最适反应温度是50℃;最适pH为5.5-6;Zn2+是酶促反应有效的激活剂.[结论]重组家蚕PLK与来源于家蚕组织的PLK具有相同的催化性质.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张剑韵	安徽农业大学生命科学院	36	305	11.0	16.0
2	黄龙全	安徽农业大学茶与食品科技学院	37	305	11.0	16.0
3	张平平	安徽农业大学生命科学院	1	5	1.0	1.0