猪分离卵泡体外培养过程中Fas/FasL对颗粒细胞凋亡的作用

• 作者: 刘红林 林鹏飞 芮荣 郝元斌 郭慧利
• 来源期刊: 动物学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 猪 有腔卵泡 颗粒细胞 凋亡 Fas/FasL
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 页码范围: 268-274
• 分类号: Q959.842|Q952.4|Q245
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1141.2010.03268

摘要

从猪卵巢分离完整有腔卵泡,按质量分为3类:健康卵泡、早期闭锁卵泡和晚期闭锁卵泡.猪分离卵泡经眼观检查后再行石蜡切片和HE染色,形态学研究表明,眼观检查对于健康卵泡的判定准确率为92%.取健康卵泡按直径大小分为3组:直径＞5 mm大卵泡组、3～5 rm中卵泡组和＜3 mm小卵泡组.卵泡培养8、16和24h,以Annexin-V FITC/PI双染流式细胞仪检测壁层颗粒细胞凋亡情况,结果发现培养卵泡颗粒细胞的总凋亡率(早期凋亡+晚期凋亡)在8 h时就已达到70%以上,至24 h则为81.1%～94.6%.收集无血清培养0、8、16、24、48和72h的卵泡颗粒细胞,用real time PCR SYBRgreen法检测各组卵泡颗粒细胞FasL和Fas mRNA相对表达量.各级卵泡颗粒细胞中FasLmRNA水平随培养时间显著增加,培养至24 h达最大值(P＜0.05);小卵泡颗粒细胞FasLmRNA水平均高于大、中卵泡组.各级卵泡颗粒细胞Fas mRNA相对表达量在培养前(0 h)差异不显著,8 h时显著增加,48 h达最大值.该实验表明,所用无血清卵泡培养体系可有效诱导卵泡颗粒细胞的凋亡,细胞凋亡是卵泡闭锁的主要诱因,但卵泡闭锁程度可因卵泡大小而异,小卵泡似乎更容易发生闭锁.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘红林	南京农业大学动物医学院	116	1257	21.0	30.0
2	芮荣	南京农业大学动物医学院	81	369	9.0	15.0
3	郭慧利	南京农业大学动物医学院	7	30	3.0	5.0
4	林鹏飞	南京农业大学动物医学院	11	38	4.0	5.0
5	郝元斌	南京农业大学动物医学院	5	19	3.0	4.0