检测禽流感抗体的重组核蛋白间接ELISA方法的建立

• 作者: 崔保安 崔沛 方忠意 李新生 陈红英
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感病毒 重组核蛋白 NP-ELISA 抗体检测
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医·水产养殖
• 页码范围: 359-363
• 分类号: S858.353
• 字数: 4034字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2010.02.024

摘要

以大肠杆菌系统表达的H9亚型禽流感病毒(AIV)核蛋白(NP)为抗原包被ELISA板,通过反应条件的筛选,建立检测禽流感抗体的重组核蛋白间接ELISA(NP-ELISA)方法.结果表明,抗原最佳包被质量浓度为7.56 μg/ml,血清最适稀释度为1:160,作用时间为60 min;辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗鸡IgG最适稀释度为1:5 000,血清和酶标抗体最适作用时间为60 min.特异性试验结果表明,NP抗原可与H5、H7和H9亚型AIV特异性抗体发生反应,经NP-ELISA检测为阳性的H9亚型AI血清样品能够被H9亚型AIV阻断,而NP抗原与新城疫等4种疫病阳性血清不发生反应.对223份待检鸡血清进行检测,NP-ELISA阳性检出率为96.86%(216/223),而血凝抑制试验、琼脂免疫扩散试验结果分别为93.72%(209/223)和81.61%(182/223),表明NP-ELISA是检测禽流感型特异性抗体的一种特异、敏感、快速、经济的血清学检测技术.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈红英	河南农业大学牧医工程学院	168	646	12.0	16.0
2	崔保安	河南农业大学牧医工程学院	274	2313	25.0	33.0
3	李新生	河南农业大学牧医工程学院	106	527	14.0	18.0
4	崔沛		8	37	3.0	6.0
5	方忠意		6	23	4.0	4.0