RNA干扰CTSL表达抑制卵巢癌细胞的侵袭和转移

• 作者: 唐步坚 张玮 李力 王素梅 黎丹戎
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 组织蛋白酶L基因(CTSL) siRNA 卵巢癌 侵袭 转移
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 525-530
• 分类号: R737.31|R730.54
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2010.05.008

摘要

目的:构建组织蛋白酶L基因(cathepsin L,CTSL)RNAi的真核表达载体,探讨干扰CTSL基因表达对卵巢癌细胞侵袭和转移的影响.方法:设计并合成4对CTSL小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),转染卵巢癌A2780细胞,RTPCR检测各转染细胞CTSL的表达,筛选沉默效果最好的siRNA序列.设计并合成CTSL-shRNA序列,与psilence4.1-CMV-neo载体连接,构建psilence4.1-CTSL表达载体.psilence4.1-CTSL转染A2780细胞,获得稳定转染克隆A2780-CTSL.RT-PCR和Western blotting验证CTSL基因干扰效果,MTF法和集落形成实验检测A2780细胞的增殖,流式细胞术检测A2780细胞周期,Transwell侵袭小室实验检测A2780细胞体外侵袭和迁移能力.结果:筛选出干扰效果最好的siRNA-CTSL-1202序列,并成功构建相应的CTSL-shRNA表达载体psilence4.1-CTSL.稳定转染psilence4.1-CTSL能沉默A2780细胞中CTSL的表达.沉默CTSL基因后可抑制A2780细胞的侵袭和转移,但不影响A2780细胞的增殖、细胞周期和黏附活性.结论:成功构建CTSL基因siRNA的真核表达载体,RNA干扰CTSL基因表达可抑制卵巢癌细胞的侵袭和转移.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王素梅	广西医科大学第一附属医院妇产科	40	188	7.0	11.0