高原鼠兔脑红蛋白基因的克隆与组织表达

• 作者: 刘寿 曹越 杨应忠 格日力 白振忠 韩淑芬 马兰
• 来源期刊: 兽类学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 脑红蛋白 高原鼠兔 基因克隆 基因表达
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 74-78
• 分类号: Q786
• 语种: 中文

摘要

克隆高原鼠兔脑红蛋白(Neuroglobin,NGB)基因编码区并检测其在成年高原鼠兔腩组织和其他组织中的表达,同时探讨高原鼠兔低氧适应的分子生物学机制.从高原鼠兔脑组织中提取总RNA,通过RT-PCR获得高原鼠兔NGB cDNA,将其与pGEM-T Easy载体连接,构建重组质粒,蓝白斑筛选阳性克隆并进行鉴定和测序;制备地高辛标记的RNA探针并采用原位杂交法(In suit hybridization,ISH)分析脑红蛋白基因在高原鼠兔脑组织中的分布;采用RT-PCR和蛋白印记(Western blot)检测高原鼠兔不同组织巾脑红蛋白的表达含量.将含有目的片段的阳性克隆经测序和Blast分析,显示其部分编码序列与GenBank中绵羊、大鼠等同源性很高(大于84%),表明本实验所克隆的序列为脑红蛋白基因;原位杂交结果显示NGB在青藏高原土著动物高原鼠兔脑部分布较为广泛;高原鼠兔不同组织中都有NGB mRNA表达,NGB基因并不是中楸神经系统所特有的,睾丸和肾上腺也有较高的表达.NGB基因在高原鼠兔脑组织和其他组织中分布较为广泛,推测NGB mRNA可能在高原鼠兔机体较为广泛的区域中发挥着作用,同时为高原低氧适应相关基因的研究提供了实验依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马兰	青海大学医学院高原医学研究中心	34	216	8.0	13.0
2	杨应忠	青海大学医学院高原医学研究中心	49	220	9.0	12.0
3	白振忠	青海大学医学院高原医学研究中心	34	176	8.0	12.0
4	格日力	青海大学医学院高原医学研究中心	152	912	15.0	20.0
5	曹越	青海大学医学院高原医学研究中心	14	95	6.0	9.0
6	刘寿	青海大学医学院高原医学研究中心	49	208	8.0	11.0
7	韩淑芬	青海大学医学院高原医学研究中心	7	35	3.0	5.0