有序排列微模板培养角膜基质细胞及其细胞生物学变化

• 作者: 周平 戴静 李晓霞 李沁华 田振彩 赵秀丽 陈建苏
• 来源期刊: 眼科研究
• 学科: 医学
• 关键词: 角膜基质细胞 有序排列细胞培养 微纹理 细胞生物学
• 年，卷（期）: 2010,（8）
• 页码范围: 699-702
• 分类号: R772.01
• 字数: 4291字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-0808.2010.08.004

摘要

目的 探讨CO2激光打标机处理的有序排列微模板培养兔角膜基质细胞的生长特征及其细胞生物学变化.方法 用CO2激光打标机刻制的聚苯乙烯有序排列微模板培养兔角膜基质细胞,模板沟槽划线间隔距离0.25mm者为窄间隔组,间隔距离1mm者为宽间隔组,平板组作为对照组.将角膜基质细胞悬液以1×105/mL细胞密度接种于培养板中,倒置显微镜下观察细胞生长情况,苏木精-伊红染色观察细胞排列的形态学差异,免疫荧光法检测培养板上细胞的波形蛋白,实时监测显微镜下观察24h窄间隔组细胞的接触指引特性及细胞的动态生长过程.结果 培养第1天倒置显微镜下见3组培养细胞贴壁生长状态无明显区别,窄间隔组和宽间隔组细胞逐渐围绕沟槽接触指引生长,表现为有序排列,且窄间隔组较宽间隔组明显.苏木精-伊红染色和免疫荧光染色显示培养的细胞在窄间隔组沟槽的接触指引下呈有序排列,呈现10余层细胞排列的平行板层结构.3组细胞波形蛋白免疫荧光染色均呈阳性反应.实时监测显微镜下可见窄间隔组细胞体部首先贴壁,在接触指引下生长,而细胞在干燥环境下的凋亡始于细胞伪足突起处.结论 利用CO2激光打标机制备的有序排列微模板可获得有序排列的角膜基质细胞,有利于在接近生理状态条件下角膜基质层的构建.