创伤弧菌溶细胞素融合蛋白对人Caco-2细胞IL-8基因表达和IL-8分泌的影响

• 作者: 丁卉 严杰 楼永良 王波 谢旦立 郑丽
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 创伤弧菌 溶细胞素 人Caco-2细胞 IL-8
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 60-65
• 页数: 6页
• 分类号: R3
• 字数: 5212字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2010.01.016

摘要

目的 研究创伤弧菌溶细胞素融合蛋白(rVvhA)对人肠上皮细胞(human intestinalepithelial cell,Caco-2)IL-8基因表达的影响.方法 IPTG诱导、表达、纯化、复性及Western blot鉴定rVvhA表达和纯化情况;CCK-8法检测rVvhA对Caco-2的细胞毒性作用;RT-PCR检测rVvhA诱导Caco-2细胞IL-8基因的表达情况;ELISA检测Caco-2细胞培养上清IL-8的分泌情况.结果 Ni~(2+)-NTA亲和层析柱对rVvhA进行纯化后纯度可达95%以上;CCK-8结果显示rVvhA活性蛋白显著降低了Caco-2细胞的存活率,有效浓度为1.5 HU/ml(P<0.05);RT-PCR结果显示,0.6 HU/ml rVvhA30 minllp可诱导Caco-2细胞IL-8 mRNA基因表达上调;ELISA结果显示,Caco-2细胞经rVvhA作用后,培养液上清中IL-8多肽的表达时相在4 h.RT-PCR与ELISA结果皆显示,IL-8基因的转录及IL-8表达皆具有时间-剂量依赖性.结论 rVvhA在转录水平上能诱导人Caco-2细胞IL-8 mRNA表达,促进IL-8的合成,在创伤弧菌引起的过度炎症反应和败血症的发生、发展中可能具有重要意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	严杰	浙江大学医学院病原生物学教研室	265	1149	14.0	20.0
2	王波	浙江省医学遗传学重点实验室温州医学院微生态学研究所	2	4	2.0	2.0
3	楼永良	浙江省医学遗传学重点实验室温州医学院微生态学研究所	4	8	2.0	2.0
4	丁卉	浙江省医学遗传学重点实验室温州医学院微生态学研究所	3	11	2.0	3.0
5	谢旦立	浙江省医学遗传学重点实验室温州医学院微生态学研究所	1	2	1.0	1.0
6	郑丽	浙江省医学遗传学重点实验室温州医学院微生态学研究所	1	2	1.0	1.0