奶牛IL-6基因克隆与原核表达

• 作者: 乔军 曹旭东 李贞 杨明锋 王正荣 陈创夫
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 奶牛 IL-6 细胞因子 原核表达
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 4-6
• 分类号: Q785|Q786
• 字数: 3313字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2010.05.146

摘要

目的:克隆新疆地区奶牛il-6基因.获得原核表达IL-6蛋白.方法:根据GenBank上牛IL-6的序列,用premier 5.0软件设计一对引物.以牛肺巨噬细胞提取的RNA反转录产物(cDNA)为模板扩增出567bp的条带,克隆到pBS-T载体,测序正确后,提取质粒经BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶切回收目的条带,亚克隆到pGEX-4T-1原核表达载体,转化DE3菌,经IPTG诱导表达.以表达产物免疫小白鼠血清为一抗榆测表达产物的反应原性.结果:成功克隆了新疆地区奶牛il-6基因,克隆部分编码188个氨基酸与GenBank公布的序列100%同源,表达出46 kDa的融合蛋白,免疫印迹检测显示原核表达牛IL-6有免疫原性.结论:新疆地区奶牛在IL-6的基因序列上与其他地方牛无差异,原核表达奶牛IL-6蛋白为在奶牛乳房炎疫苗中的佐剂效果研究打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	乔军	石河子大学动物科技学院	103	346	8.0	14.0
2	王正荣	石河子大学动物科技学院	7	41	3.0	6.0
3	李贞	石河子大学动物科技学院	1	1	1.0	1.0