人偏肺病毒基因型双重逆转录PCR检测方法的建立

• 作者: 孙宇 廖斌 朱汝南 王芳 赵林清 邓洁 钱渊 黄荣研
• 来源期刊: 中华检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 变性肺病毒 基因型 逆转录聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 临床实验诊断研究
• 页码范围: 33-36
• 页数: 4页
• 分类号: R4
• 字数: 3196字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2010.01.008

摘要

目的 建立一种鉴别不同基因型hMPV的RT-PCR方法.方法 根据不同基因型的hMPV G蛋白基因序列设计合成A、B基因型的特异性引物,在一次双重PCR反应中根据扩增产物大小鉴别不同基因型.用该方法鉴别37份hMPV阳性的临床标本的基因型.结果 用hMPV G蛋白编码基因的分型引物进行PCR反应,对已知的hMPV阳性标本直接进行分型得到的扩增产物大小易于区分;对常见的呼吸道病毒无非特异扩增,显示引物特异性良好.对37份临床标本进行基因分型结果显示,20份A基因型分型结果与M基因测序分型结果一致,17份经M基因测序分型为B基因型的阳性标本中有14份与M基因测序分型结果一致,3份未得到扩增产物从而不能分型,总符合率为91.9%[(20+14)/37].结论 成功建立了一种可以鉴别不同基因型的hMPV的RT-PCR方法.