高活力5'-磷酸二酯酶制备及水解RNA的研究

• 作者: 何义进 华洵璐 张一平 李靖 谢骏
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 工学
• 关键词: 麦芽根 5'-磷酸二酯酶 核苷酸 超滤 盐析
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 开发与应用
• 页码范围: 62-65
• 页数: 4页
• 分类号: TS262.5|TS261.9
• 字数: 4598字
• 语种: 中文

摘要

目的:获得高活力5'-磷酸二酯酶液,提高核酸RNA酶解效率.方法:采用超滤和盐析技术对从麦芽根浸提液中纯化5'-磷酸二酯酶工艺进行研究,采用单因子试验法优化酶解工艺条件.结果:浸提液依次经过5万Da超滤膜浓缩、40%饱和度硫酸铵盐析、5万Da超滤膜脱盐后,酶活力可达1 500U/ml;第1次超滤膜透过液可作为浸提液循环使用,酶活力是水浸提的1.15倍;第2次超滤膜透过液浓缩5倍后,可回收56.46%硫酸铵,浓缩母液可按1:2比例循环使用;在底物浓度5.8%、酶用量8%、反应时间2h条件下,RNA酶解率可达95%.结论:初步建立了适合工业化规模的核苷酸生产新工艺.