产气荚膜梭菌α毒素基因的定点突变与表达

• 作者: 许崇利 许崇波
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 产气荚膜梭菌 α毒素基因 定点突变 表达
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 遗传育种·耕作栽培·生理生化
• 页码范围: 258-263
• 分类号: Q786
• 字数: 2770字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2010.02.007

摘要

选择可能影响α毒素生物活性的氨基酸相关碱基位点进行定点突变,构建α毒素基因的突变体并在大肠杆菌中表达.利用PCR定点突变技术,进行第68位组氨酸→亮氨酸的定点突变,构建含α毒素突变基因表达质粒的重组菌株BL21(DE3)pLys(pXMCPA02).结果表明,α毒素突变基因第287位核苷酸由A→T,经酶切鉴定和序列测定证实,构建的重组质粒pXMCPA02含有α毒素突变基因,且基因序列和阅读框架正确;重组菌株BL21(DE3)pLys(pXMCPA02)表达产物经SDS-PAGE分析,其表达量占菌体总蛋白相对含量的33.82%.因此,已成功构建了α毒素基因突变体,并实现了在重组大肠杆菌中的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许崇波	大连大学医学院	70	565	12.0	20.0