蛋白A亲和层析法纯化抗乙肝核心抗原单克隆抗体

• 作者: 吴淑江 应国清 易喻 朱克寅 李敏 梅建凤 祝骥
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 蛋白A亲和层析 单克隆抗体 乙肝核心抗原 纯化
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 67-72
• 页数: 6页
• 分类号: Q511
• 语种: 中文

摘要

建立从小鼠腹水中纯化抗乙肝核心抗(HBcA4g)单克隆抗体的一步层析法.将含抗HBcAg单克隆抗体的腹水经离心、过滤和缓冲溶液变换预处理后,采用HiTrap rProtein A FF亲和层析柱纯化,并探讨了上样缓冲液的pH值和NaCI浓度,洗脱液的种类、pH值以及体积流量对抗体纯度及回收率的影响,纯化后的单克隆抗体的生物学活性用间接ELISA法测定.结果显示,以pH7.0,20 mmol/L PB+3.0 mol/LNaCl为上样缓冲液,0.1 mol/L Gly-HCI为洗脱液,体积流量为5.0 ml/min时,抗HBcAg单抗的纯度大于95%,回收率达75%,纯化后的单克隆抗体的生物学活性没有下降.本研究建立了蛋白A亲和层析法纯化抗HBcAg单克隆抗体的方法,其操作简便、快速而且效果良好.