翘嘴鳜NADPH氧化酶2个催化亚基cDNA的克隆和表达特征

• 作者: 刘毅 文春根 胡宝庆
• 来源期刊: 中国生物化学与分子生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 翘嘴鳜 NADPH氧化酶 分子克隆和表征 柱状黄杆茵
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 71-80
• 页数: 10页
• 分类号: Q785|Q959.483
• 语种: 中文

摘要

吞噬细胞NADPH氧化酶能生成用于清除病原微生物的活性氧(reactive oxygen species,ROS),在机体的防御体系中起着非常重要的作用.本文利用RT-PCR结合RACE-PCR的方法,克隆到翘嘴鳜NADPH氧化酶的催化亚基gp91phox和p22phox的cDNA全长.并研究两者在正常的翘嘴鳜和注射了柱状黄杆菌灭活菌苗(FKG_4)的翘嘴鳜组织中的表达模式.结果表明,gp91phox基因cDNA序列全长2 037 nt,开放阅读框长度为1 698 nt,翻译成565个氨基酸;p22phox基因cDNA序列全长1 296 nt,开放阅读框561 nt,翻译成186个氨基酸.将这2个亚基推导的氨基酸序列与人的对应亚基相比,相似性分别为68.7%和60.8%,且具有相似的结构域和功能域,说明翘嘴鳜与人的NADPH氧化酶具有相似的功能活性.半定量PCR分析显示,在翘嘴鳜血液、脑、心脏、肾、肝、脾、胸腺等11种组织中均能检测到gp91phox和p22phox的基因表达.经FKG_4免疫后,gp91phox在翘嘴鳜血液、头肾和脾3种组织中的表达量显著上升,p22phox在头肾和脾2种组织中的表达量显著上升.由此推断,NADPH氧化酶可能参与了机体的抗茵免疫应答.