家蚕核型多角体病毒gp41基因的融合表达及功能鉴定

• 作者: 朱莎 李兵 沈卫德
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 家蚕核型多角体病毒 gp41基因 杆状病毒表达系统 绿色荧光蛋白 融合表达 免疫印迹检测
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 79-83
• 页数: 5页
• 分类号: S884.5~+1|Q78
• 字数: 3718字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0257-4799.2010.01.012

摘要

为了研究家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus, BmNPV)中GP41蛋白的包装功能,从BmNPV基因组中克隆了gp41基因,并将其克隆到杆状病毒转移载体pFastBac1-gfp中,构建重组转移载体pFastBac1-gp41-gfp,再利用杆状病毒表达系统(Bac-to-Bac)筛选重组杆状病毒,在家蚕BmN细胞系中进行融合表达和定位分析.SDS-PAGE和Western blot检测结果显示,经重组杆状病毒r-gp41-gfp感染的BmN细胞新增一条大小为65 kD左右的蛋白条带,证明该融合蛋白在BmN细胞中成功表达.用激光共聚焦显微镜观察到绿色荧光充满于细胞质中,不能形成聚集体.与野生型BmNPV混合感染的实验也表明荧光出现的位置与多角体无关,说明GP41-GFP蛋白不能附着在多角体表面,融合表达可能影响了GP41蛋白与多角体的结合.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李兵	苏州大学基础医学与生物科学学院	123	946	15.0	23.0
3	沈卫德	苏州大学基础医学与生物科学学院	158	1178	17.0	24.0
9	朱莎	苏州大学基础医学与生物科学学院	3	19	2.0	3.0