基于Hsp90 ATPase活性的抑制剂筛选模型研究

• 作者: 张连茹 杨世新 贺晓萌 郭秋菊 陈俊杰 陈澄
• 来源期刊: 厦门大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: pGEX-4T-1 Hsp90 ATPase活性
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 711-716
• 分类号: Q356.1
• 字数: 4351字
• 语种: 中文

摘要

热休克蛋白90(Heat shock protein,Hsp90)作为分子伴侣,参与调控肿瘤细胞多条信号通路,对肿瘤细胞生长有重要作用.以pGEX-4T-1为载体,构建了Hsp90表达载体于宿主大肠杆菌中表达.通过孔雀绿磷钼酸铵-无机磷检测法,测定异源表达的Hsp90 ATPase活性.实验得出Hsp90对ATP的米氏常数(Km)为369.1 μmol/L,在Hsp90和ATP浓度分别为0.18,1 mmol/L时转换效率常数(kcat)为1.6 min-1,最大反应速率(Vmax)为1.0 μmol/(L·min).基于该方法,建立Hsp90 ATPase活性抑制剂筛选模型,以Geldanamycin和Radicicol为阳性对照,发现Rifamycin、Rugulosin及MycoE也有较强的Hsp90 ATPase抑制活性.该方法可用于筛选抗肿瘤候选化合物的研究,同时也可为具有ATPase活性蛋白的抑制剂筛选提供参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈俊杰	厦门大学生命科学学院	6	23	3.0	4.0
2	贺晓萌	厦门大学生命科学学院	2	9	2.0	2.0
3	张连茹	厦门大学生命科学学院	16	98	6.0	9.0
4	郭秋菊	厦门大学生命科学学院	2	22	2.0	2.0
5	杨世新	厦门大学生命科学学院	1	7	1.0	1.0
6	陈澄	厦门大学生命科学学院	2	33	2.0	2.0