一种柔嫩艾美耳球虫棒状体蛋白单抗的制备及初步应用

• 作者: 姜连连 岳城 平宪卿 朱顺海 李洋 董辉 赵其平 郭涛 韩红玉 黄兵
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 柔嫩艾美耳球虫 单克隆抗体 分子定位
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 47-51
• 分类号: S852.723|Q7
• 字数: 3506字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6422.2010.02.009

摘要

利用原核表达的柔嫩艾美耳球虫棒状体蛋白(EtRP)的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,经4次免疫后取脾脏制备免疫脾细胞,与小鼠骨髓瘤细胞SP2/O融合,经间接ELISA和Western blot筛选获得一株抗EtRP蛋白的特异性单克隆抗体细胞株,命名为2E3,亚类鉴定为IgG2a.细胞上清和小鼠腹水的效价分别为1:40和1:2.56×104.利用该单抗对EtRP在柔嫩艾美耳球虫子孢子中的分布进行分子定位,结果显示该蛋白主要分布于子孢子的顶端;而当子孢子在DMEM培养基中41℃孵育1 h后,该蛋白则分布于整个虫体.研究结果表明,成功制备了EtRP单克隆抗体,为进一步研究球虫相关蛋白功能奠定了基础.