莱克多巴胺单克隆抗体间接竞争ELISA检测方法的建立

• 作者: 吴艳涛 张小荣 王寿利 薛峰 陆承平 高以明
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 莱克多巴胺 单克隆抗体 竞争ELISA
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 8-10
• 分类号: S859
• 字数: 2490字
• 语种: 中文

摘要

用混合酸酐法将莱克多巴胺(Rac)与匙孔蓝蛋白(KLH)、牛血清白蛋白(BSA)偶联,经紫外光谱扫描确定偶联成功,测得偶联物Rac-KLH浓度为3.6 mg/mL,Rac-BSA浓度为6.2 mg/mL.以偶联物Rac-KLH作为免疫原,免疫6～8周龄雌性BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞SP2/O-Ag-14进行融合.以Rac-BSA作为包被抗原,经间接ELISA筛选出阳性细胞株.再用有限稀释法进行多次亚克隆,获得稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株1 D9、1F3、2C11、5C3、3A10、4A8、6B7、6D5、7C11、7D3.其中单克隆抗体5C3和3A10间接ELISA效价1:500 000,对莱克多巴胺的半数阻断浓度(IC50)均为3.98 ng/mL,对盐酸克伦特罗和沙丁醇胺的IC50均大于2 000 ng/mL:对盐酸克伦特罗和沙丁醇胺的交叉反应率均小于0.2%.间接竞争ELISA检测莱克多巴胺在0.5～100 ng/mL范围内为线性分布,确定的最低检测限为0.5 ng/mL.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张小荣	扬州大学兽医学院	73	540	14.0	20.0
2	吴艳涛	扬州大学兽医学院	105	1064	18.0	27.0
3	陆承平	南京农业大学动物医学院	387	5495	37.0	51.0
4	高以明	南京农业大学动物医学院	2	18	2.0	2.0
8	王寿利	扬州大学兽医学院	3	22	3.0	3.0
9	薛峰		15	67	5.0	7.0