大鼠视网膜色素上皮细胞分离的改良及其MMP表达

• 作者: 张纯 李颖 王薇 许永根 陈晓勇 黄琛
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 医学
• 关键词: 视网膜色素上皮细胞 基质金属蛋白酶 细胞培养 大鼠
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 109-112,后插2-后插3
• 页数: 6页
• 分类号: R779112
• 字数: 3138字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2010.02.005

摘要

目的 探索和优化大鼠视网膜色素上皮(RPE)细胞分离培养的方法 , 评价RPE细胞的存活状态及细胞基质金属蛋白酶(MMP)的表达, 为相关眼底疾病的研究提供细胞来源. 方法 采用改良的三步酶消化法分离大鼠RPE细胞, 并进行细胞体外培养.倒置显微镜观察细胞形态, 细胞生长曲线评价不同培养代数的RPE细胞的增殖活力.免疫荧光检测CRALBP和角蛋白表达鉴定RPE细胞, 并观察不同培养代数RPE细胞中多种基质金属蛋白酶的表达. 结果 分离培养的RPE细胞可呈梭形、六角形, 并维持RPE细胞特征性蛋白CRALBP和角蛋白表达, 但细胞内色素成分随着细胞分裂和传代次数的增多逐渐减少.基质金属蛋白酶MMP2、MMP3、MMP9和MMP10在第1代和第3代RPE细胞中均表达阳性, 且表达强度未见明显改变. 结论 应用改良的三步酶消化法可以成功的分离培养大鼠RPE细胞, 并在第1代和第3代RPE细胞维持基质金属蛋白酶MMP2、MMP3、MMP9和MMP10的阳性表达.体外培养的大鼠RPE细胞为研究视网膜相关疾病提供了细胞模型.