含有分裂型内含肽DnaE基因的表达盒设计、合成及高效表达载体的构建

• 作者: 师明磊 王东 王洋 田靖 耿排力 赵志虎 赵珺
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 内含肽DnaE 基因设计与合成 生物信息学
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 751-756
• 分类号: Q78
• 字数: 4349字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2010.06.001

摘要

目的:建立一种简便、快捷的基因从头设计、优化与合成策略,进行含有分裂型内含肽DnaE基因的表达盒全合成并构建高效表达载体.方法:以免费软件GeneDesign 3.0为主要平台,同时结合Tandem Repeats Finder、UNAFold等不同生物信息学软件,对含有DnaE基因、合适酶切位点的表达盒进行设计与分段合成;合成寡核苷酸片段通过重叠PCR进行组装与克隆.结果:利用建立的设计流程,合成了大小为44～64 nt的14段寡核苷酸片段,通过重叠PCR,实现了14段寡核苷酸片段的一次性组装,经过克隆、酶切鉴定、序列分析得到了序列完全正确的表达载体.结论:建立了一套有效的、基于免费软件的基因从头设计与合成的策略,构建了可以用于环肽小分子文库表达与筛选的表达载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王东	军事医学科学院生物工程研究所	5	7	2.0	2.0
2	耿排力	青海大学医学院基础医学部	78	244	6.0	12.0
3	赵珺	青海大学医学院基础医学部	9	6	1.0	2.0
7	王洋	军事医学科学院生物工程研究所	11	42	3.0	6.0
8	师明磊	军事医学科学院生物工程研究所	17	69	5.0	7.0
9	田靖	军事医学科学院生物工程研究所	4	13	2.0	3.0