杂花苜蓿SRAP-PCR反应体系的正交优化

• 作者: 卢欣石 周良彬 赖黎丽
• 来源期刊: 草地学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 杂花苜蓿 SRAP PCR 正交设计 优化
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 345-351
• 分类号: Q943
• 字数: 4813字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11733/j.issn.1007-0435.2010.03.007

摘要

利用正交设计L16(45)对杂花苜蓿(Medicago varia Martin.)SRAP-PCR反应体系的5因素(Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTP、引物)在4个水平上进行优化试验,旨在建立一套适用于苜蓿属(Medicago L.)种质资源的SRAP标记技术体系.结果表明:各因素对PCR反应结果都有显著影响,由F值可知,dNTP的量对反应结果影响最大,其次是Taq酶的量,模版DNA浓度的影响最小,各因素水平的变化对PCR反应的影响依次为:dNTP>Taq酶>Mg2+>引物>模板DNA;筛选出各反应因素的最佳水平,建立杂花苜蓿SRAP-PCR反应的最佳体系(25 μL )为:dNTP 2 μL( 0.20 mmol·L-1),Taq DNA 聚合酶0.3 μL (1.50 U), Mg2+3 μL(1.50 mmol·L-1),上、下游引物各1 μL (0.40 μmol·L-1),50 ng模板DNA1 μL,10×PCR buffer 2.5 μL (不含Mg2+).这一优化体系的建立,为今后利用SRAP标记技术进行苜蓿属植物遗传图谱构建、遗传多样性分析及种质资源鉴定等研究奠定了技术基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢欣石	北京林业大学草业科学系	120	2661	29.0	46.0
2	周良彬	北京林业大学草业科学系	2	30	2.0	2.0
3	赖黎丽	新疆农业大学草业与环境科学学院	1	6	1.0	1.0