家蝇抗菌肽Defensin在毕赤酵母中的表达及活性鉴定

• 作者: 卢雪梅 朱家勇 李小波 王婷婷 褚夫江 金小宝 马艳
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 家蝇 抗菌肤 Defensin 毕赤酵母 表达
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 页码范围: 194-197
• 分类号: Q96
• 字数: 3105字
• 语种: 中文

摘要

拟通过酵母系统表达家蝇抗菌肽Defensin基因,并初步鉴定其抗菌活性.采用限制性内切酶SacI将分泌型重组表达质粒pPIC9K/Defensin线性化后,运用氯化锂转化法将其转入巴斯德毕赤酵母GS115中,行G418加压筛选和PCR鉴定;所得阳性转化子转至摇瓶,28℃条件下0.5%甲醇诱导表达,连续诱导培养4 d后,上清液进行Tricine-SDS-PAGE检测表达效果,并采用琼脂糖孔穴扩散法检测表达产物对大肠杆菌E.coli K12 D31的抑制作用.结果显示,家蝇抗菌肽Defensin在毕赤酵母中得到了成功表达,表达产物对大肠杆菌E.coli K12D31的生长有抑制作用.说明酵母系统适合抗菌肽的表达.