番鸭呼肠孤病毒MW9710株δC蛋白基因在毕赤酵母中表达

• 作者: 朱小丽 林锋强 欧阳岁东 王劭 程晓霞 胡奇林 陈仕龙 陈少莺
• 来源期刊: 福建农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 番鸭呼肠孤病毒 δC蛋白基因 毕赤酵母 表达
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 页码范围: 241-244
• 分类号: S852.65
• 字数: 2792字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0384.2010.03.001

摘要

将番鸭呼肠孤病毒MW9710株的σC蛋白基因与毕赤酵母分泌性表达载体pPIC9K相连接,构建重组表达载体pPIC9K -σC,转化大肠杆菌DH5α,经PCR、酶切和测序鉴定,基因序列完全正确.纯化的重组质粒pPIC9K -σC用内切酶SacⅠ线性化,电转化毕赤酵母,使重组表达载体与酵母染色体发生同源整合,采用G418抗性梯度法筛选多拷贝重组菌株,用甲醇进行诱导表达,通过SDS-PAGE 和Western-blot分析表达产物,结果表明目的蛋白得到了高效表达,并且具有免疫反应性.