泡桐AFLP反应体系的建立及引物筛选

• 作者: 何佳 曹喜兵 翟晓巧 范国强
• 来源期刊: 河南农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 泡桐 AFLP 反应体系 引物筛选
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 林业科学
• 页码范围: 145-150
• 分类号: S792.43
• 字数: 3796字
• 语种: 中文

摘要

以豫杂一号泡桐为材料,通过对影响AFLP技术体系的各主要因素的研究,建立了适于泡桐AFLP分析的技术体系.结果表明最佳酶切体系(20μL)为500 ng模板DNA,3 U的Pst 1和Mse I,在37℃下双酶切3 h;20μL最佳连接体系中为酶切产物15 μL,0.25 μmol·L-1Pst I接头,2.5 μmol·L-1 Mse I接头,1 μL 10×T4 Buff-er,2 U T4连接酶,22℃连接18 h;20 μL最佳预扩反应体系中5 μL稀释10倍的连接产物,100 μmol·L-1dNTP,2 U Taq酶,250 μmol.L-1 Pst I和Mse I引物(P+AGT/M+AGT),2 μL 10×PCR Buffer.20 μL最佳选择性扩增反应体系中5 μL稀释20倍预扩增产物,100 μmol·L-1dNTP,2 U Taq酶,350 μmol·L-1 Pst I和Mse I引物(P+AGT/M+AGT),2 μL 10×PCR Buffer.最后,筛选出了97对适宜于泡桐AFLP分析的引物.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范国强	河南农业大学泡桐研究所	106	1402	22.0	31.0
2	翟晓巧	河南农业大学泡桐研究所	50	741	17.0	24.0
3	曹喜兵	河南农业大学泡桐研究所	17	147	8.0	12.0
4	何佳	河南农业大学泡桐研究所	12	59	4.0	7.0