苎麻Actin1基因克隆及其在韧皮部纤维不同发育阶段的表达

• 作者: 刘建新 唐守伟 喻春明 朱四元 朱爱国 熊和平 王延周 马雄风
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 苎麻 肌动蛋白 基因克隆 实时定量PCR
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·分子遗传学
• 页码范围: 101-108
• 页数: 8页
• 分类号: S5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2010.00101

摘要

通过cDNA文库的PCR筛选法获得苎麻内源肌动蛋白基因片段,采用苎麻[Boehmeria nivea(L.)Gaud]中苎1号为材料,结合RACE技术获得了苎麻的Actin1蛋白编码基因(BnACTIN1)的cDNA全长序列(GenBank登录号为DQ665832,2009年8月1日公布),该基因全长cDNA序列1 782 bp,编码区长1 134 bp,编码377个氨基酸残基.Blastn分析表明,BnACTIN1基因与桑树(Morus alba:DQ785808)、蓖麻子(Ricinus communis:AY360221)、棉花(Gossypium hirsutum:AY305723-305736)等植物的肌动蛋白基因序列有高度的同源性.对推导的氨基酸序列进行分子进化分析表明,该基因与棉花Actin蛋白家族AAP73451.1、AAP73457.1聚为一类,三者之间的亲源关系最近.建立荧光定量PCR体系,用18S rRNA和Histone3内参基因对表达水平均一化,分析BnACTIN1基因在苎麻纤维细胞伸长过程中的表达水平变化.结果表明,在株高97 cm时最高,约为株高11、150和220 cm时表达量的230倍以上,是株高47 cm时期的20倍.本研究揭示的所获得BnACTIN1序列为苎麻的Actin1蛋白编码基因,其最高表达时期开始于纤维快速伸长时期,但稍早于纤维发育的高峰期,推测该基因可能与韧皮部纤维伸长过程中的肌细胞骨架形成有关.