合成引物碱基缺失造成木聚糖酶的移码突变

• 作者: 刘亮伟 卢雪丽 李运锋 胡瑜
• 来源期刊: 《福建农林大学学报（自然科学版）》
• 关键词: 木聚糖酶 引物 碱基缺失 移码突变 检测
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 269-273
• 分类号: Q556
• 语种: 中文

摘要

黑曲霉木聚糖酶xynⅢ酶分子改造时,常出现引物碱基缺失造成扩增基因移码突变.本研究将xynⅢ克隆入表达载体pET20b,分析移码突变酶C-端氨基酸序列,探讨了该碱基缺失突变的检测方法.引物中缺失1或2 bp碱基时,扩增基因产生2种移码突变酶,分别在正常酶分子C-端增加30或12个氨基酸,比正常酶分子质量分别增加6或2 ku;而缺失3 bp碱基时不产生移码突变,只比正常酶分子少1个氨基酸,含有6个His标签;通过SDS-PAGE可将移码突变酶与正常酶分子分开,从而将移码突变基因与正常基因分开,这个理论与DNA测序结果完全吻合.同时发现2 bp碱基缺失突变是1 bp碱基缺失突变的2倍,分析了其产生原因.最后,提出了避免引物中碱基缺失移码突变发生的预防措施.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘亮伟	河南农业大学生命科学学院	36	241	9.0	14.0
2	胡瑜	河南农业大学生命科学学院	5	23	2.0	4.0
3	卢雪丽	河南农业大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
4	李运锋	河南农业大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0