抗病基因VpPR10转化'砀山酥梨'及转化条件的优化

• 作者: 孟颢光 张朝红 王跃进
• 来源期刊: 园艺学报
• 学科: 农学
• 关键词: 梨 抗病基因 农杆菌介导 病程相关蛋白基因(VpPR10) 条件优化
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 页码范围: 1567-1574
• 分类号: S661.2
• 语种: 中文

摘要

将源自中国野生华东葡萄的抗病基因--病程相关蛋白基因导入'砀山酥梨',并对转化系统条件进行优化.首先将VpPR10基因重组于中间表达载体pWR-Ⅱ,得到重组质粒pWR-Ⅱ-VpPR10:继而以改进冻融法将其导入根癌农杆菌EHA105,再利用根癌农杆菌介导的叶盘转化法进行遗传转化.根癌农杆菌浓度OD600=0.5,离体叶片侵染5 min,在含有100 μmol·L-1乙酰丁香酮的培养基中暗处共培养48 h有利于砀山酥梨的遗传转化;经PCR分析、Southern blot和RT-PCR检测,证明目的基因VpPR10已导入并整合到砀山酥梨基因组中;转化率为1.08%.