人β淀粉样蛋白1-42在大肠杆菌中的表达纯化及鉴定

• 作者: 杨清武 熊任平 熊坤林
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: β淀粉样蛋白1-42 阿尔茨海默病 蛋白表达
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 262-264,267,后插1
• 页数: 5页
• 分类号: R749.16|R446.61
• 字数: 4116字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2010.03.003

摘要

目的 在大肠杆菌中表达人源性β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42),纯化表达蛋白并进行Western blot鉴定.方法根据Gen Bank中人源性Aβ1-42编码序列,分为3个片段人工合成,经退火延伸为全长dsDNA序列,酶切后连接至表达质粒pET-28a(+)构建为重组质粒pET-28a-Aβ1-42,转化至大肠杆菌BL21株中,筛选高表达株,诱导表达,利用Ni+株亲和纯化表达蛋白,SDS-PAGE后,转印PVDF膜,进行Western blot鉴定.结果获得纯化的大肠杆菌表达蛋白Aβ1-42,表达形式为包涵体,经Western blot鉴定为人源性Aβ1-42蛋白.结论 本研究获得了纯化的Aβ1-42蛋白,为下一步采用Aβ1-42标记该蛋白作为诊断分子奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	熊坤林	第三军医大学大坪医院放射科	40	216	9.0	12.0
2	杨清武	第三军医大学大坪医院神经内科	57	324	9.0	14.0
3	熊任平	野战外科研究所第六研究室	1	0	0.0	0.0