myh6蛋白的表达、纯化及多克隆抗体制备

• 作者: 吴秀山 宋怀婷 李竞超 梁艳 袁婺洲
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: myh6 融合蛋白 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 644-648
• 分类号: Q78
• 字数: 3017字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2010.05.014

摘要

斑马鱼心脏发育模型中,myh6编码是一种促进心室心肌细胞扩张的转录因子.为了进一步研究myh6在心脏发育和心脏疾病发生中的功能,需要获得斑马鱼myh6蛋白并制备其抗体.从斑马鱼心脏组织中提取总RNA,通过反转录得到心脏组织特异表达基因的cDNA,PCR扩增得到myh6部分编码区序列,然后将其连接到pGEX-4T载体上获得原核表达.经酶切及测序鉴定后,转化BL21细菌,并用IPTG诱导表达融合蛋白,谷胱甘肽琼脂糖珠亲和纯化,将纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并用Western blotting检测抗体的特异性.结果显示,获得了myh6原核表达重组融合蛋白及高效价的特异性兔抗myh6多克隆抗体,为myh6功能的进一步研究提供了有力的工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴秀山	湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室心脏发育研究中心	80	274	8.0	14.0
2	梁艳	湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室心脏发育研究中心	6	10	2.0	3.0
3	宋怀婷	湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室心脏发育研究中心	1	2	1.0	1.0
4	李竞超	湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室心脏发育研究中心	2	2	1.0	1.0