聚合酶链式反应-变性高效液相色谱法检测5种食源性致病菌

• 作者: 吴永宁 杨福江 沈建忠 王玉平
• 来源期刊: 中国食品卫生杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 变性高效液相色谱 聚合酶链式反应 食源性致病菌 16S rRNA基因
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 389-392
• 分类号: R155.5|TS207.4
• 语种: 中文

摘要

目的 建立聚合酶链式反应与变性高效液相色谱(polymerase chain reaction-denaturing high-performance liquid chromatography,PCR-DHPLC)相结合的方法,快速检测5种食源性致病菌(沙门菌、副溶血性弧菌、福氏志贺菌、大肠埃希菌O157:H7和单核细胞增生李斯特菌).方法 针对16S rRNA基因保守区设计引物,PCR 扩增产物用变性高效液相色谱仪检测,并进行敏感性、特异性、检出率等指标测定.结果 柱温61.4℃时,5种致病菌PCR产物分别呈现特异DHPLC色谱图,保留时间均为7 min左右.对沙门菌、副溶血性弧菌和单核细胞增生李斯特菌检出限均为5～10 CFU/ml,福氏志贺菌和大肠埃希菌O157:H7均为1～5 CFU/ml.对83株目的分离株的检出符合率为100%,38株非目的分离株检测均为阴性;对人工污染食品中的5种致病菌均可正确检出.结论 该PCRDHPLC方法具有较高的敏感性和特异性,可用于食品中5种食源性致病菌的高通量快速检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴永宁	中国疾病预防控制中心营养与食品安全所	144	2044	25.0	34.0
2	沈建忠		193	2889	31.0	42.0
3	王玉平		15	41	4.0	5.0
4	杨福江		4	24	2.0	4.0