布氏杆菌和结核杆菌二重实时荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用

• 作者: 乔军 任艳 孟茹 张辉 王正荣 蒋松 陈创夫
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 布氏杆菌 结核杆菌 二重实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2010,（8）
• 页码范围: 1012-1017
• 分类号: S852.614|S852.618
• 字数: 4236字
• 语种: 中文

摘要

本试验旨在利用二重实时荧光定量PCR技术建立鉴别诊断布氏杆菌和结核杆菌的方法.通过筛选布氏杆菌omp10、omp19、omp17、omp25、omp31和结核杆菌cfp10基因的最佳引物组合,建立二重实时定量PCR鉴别诊断方法,对该方法进行稳定性、特异性和敏感性试验,并对临床样品及模拟样品进行检测.经筛选布氏杆菌的omp25基因与结核杆菌cfp10基因引物组合最佳,该二重实时荧光定量PCR方法中布氏杆菌Tm值为88～89℃,结核杆菌Tm值为90～91℃,对其他供试的菌株则为阴性;该方法对布氏杆菌的DNA最低检出量为20拷贝·μL-1,结核杆菌为50拷贝·μL-1,两病原都存在时为100拷贝·μL-1,比常规PCR高100倍.利用所建立的二重荧光定量PCR方法及常规PCR,对24份结核痰样、11份布氏杆菌基因粗提物及30份模拟奶样进行检测,符合率为100%.本试验建立的方法可用于同时检测布氏杆菌和结核杆菌,并且具有良好的特异性、敏感性和稳定性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈创夫	石河子大学动物科技学院	192	732	14.0	17.0
2	乔军	石河子大学动物科技学院	103	346	8.0	14.0
3	张辉	石河子大学动物科技学院	79	248	9.0	12.0
4	任艳	石河子大学动物科技学院	19	72	5.0	8.0
5	蒋松	石河子大学动物科技学院	17	118	6.0	10.0
6	孟茹	石河子大学动物科技学院	6	47	4.0	6.0
7	王正荣	石河子大学动物科技学院	7	41	3.0	6.0