人源抗滋养层细胞表面抗原-2基因工程抗体Fab的制备及特性分析

• 作者: Brian Cao 唐奇 张慧林 朱进 林红 梁洁 管晓虹 苏亦平
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 噬菌体抗体库 胰腺癌 人源抗Trop-2抗体
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 页码范围: 1101-1107
• 页数: 7页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1206.2010.00211

摘要

应用噬菌体抗体库技术制备全人源抗滋养层细胞表面抗原-2(Trop-2)特异性Fab抗体片段.抗体库经细胞筛选和固相抗原筛选,获得特异性的阳性克隆.阳性载体经核酸序列分析后,构建工程菌,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析,呈现28 ku和32 ku大小的两条蛋白质条带.Fab分子经流式细胞术、细胞免疫荧光检测,结果表明,Fab能够与BxPc3细胞膜蛋白特异性结合,而与NIH3T3细胞不结合.免疫共沉淀与质谱分析结果表明,该Fab分子能够与Trop-2蛋白特异性结合.免疫组化显示,该抗体可结合胰腺癌细胞膜蛋白,在细胞培养液中加入Fab,能够抑制BxPc3细胞的生长.以上研究结果提示,该抗体有望成为胰腺癌临床影像诊断或治疗的候选分子.