尺寸排阻色谱柱上尿素梯度复性全长人PPAR-γ

• 作者: 余瑜 张雪梅 李伟 段雯 郑晓红
• 来源期刊: 光谱实验室
• 学科: 化学
• 关键词: 过氧化物酶体增殖物激活受体 复性 尺寸排阻色谱 紫外光谱 基质辅助激光解析-电离飞行时间质谱
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 1614-1620
• 分类号: O657.63
• 字数: 2513字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-8138.2010.04.094

摘要

建立尺寸排阻色谱柱上尿素梯度复性全长人PPAR-γ重组蛋白的方法.利用尺寸排阻色谱柱上尿素梯度除去变性剂直接复性变性蛋白.添加尿素和精氨酸抑制聚集以提高复性产率,加入Zn2+促进变性蛋白形成正确折叠.复性后,重组蛋白的尺寸排阻色谱保留体积增大;紫外光谱最大吸收波长从234.0nm变为280.8nm;基质辅助激光解析-电离飞行时间质谱分析重组蛋白的完整性,测得分子量与理论值一致;放射配体受体结合饱和实验测得解离常数(Kd)为89±4nmol/L;复性产率为52.7%.结果表明本文所建立的方法能成功用于复性变性全长人PPAR-γ,获得可用于结构和功能研究的具有生物学活性的全长人PPAR-γ蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张雪梅	重庆医科大学社区医疗中心	75	270	9.0	13.0
2	李伟	重庆医科大学药学院药物化学教研室	43	253	8.0	15.0
3	余瑜	重庆医科大学药学院药物化学教研室	72	192	7.0	11.0
4	段雯	重庆医科大学药学院药物化学教研室	3	3	1.0	1.0
5	郑晓红	重庆医科大学药学院药物化学教研室	3	3	1.0	1.0