应用荧光定量PCR和Western-blot检测RNA干扰肺腺癌A549细胞STAT3基因表达水平的实验研究

• 作者: 张洁 徐丽娜 房洁 王鸿程 罗麟洁
• 来源期刊: 泸州医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 肺癌 RNA干扰 STAT3 基因治疗
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 498-502
• 分类号: R734.2
• 字数: 3825字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2669.2010.05.006

摘要

目的:研究RNAi技术对人肺腺癌A549细胞系中STAT3基因的阻断效应,探讨STAT3在肺痛中的重要作用,为肺癌的基因治疗寻找新的靶点.方法:将化学合成siRNA用脂质体介导法转染肺腺癌A549细胞,应用荧光定最PCR法检测RNA干扰后STAT3 mRJNA表达量,得出抑制率.应用Western-blot检测RNA干扰后对STAT3蛋白表达的影响.结果:成功将siRNA转染肺腺癌A549细胞,荧光定最PCR结果显示,在转染24h、48h、72h后,各干扰组与阴性组比较STAT3基因表达量明显下调(p<0.05),Western blot显示转染前后STAT3蛋白的表达水平明显受到抑制,干扰组与阴性组空白组相比具有显著差异(P<0.05),内参基因在各组的表达量无明显差异.结论:将合成的STAT3 siRNA能有效抑制STAT3蛋白的表达、降低STAT3 mRNA水平,对STAT3有高效和特异的沉默作用,以STAT3为靶点的RNA干扰技术可望成为肺癌基因治疗的新策略.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王鸿程	泸州医学院附属医院呼吸科	77	282	9.0	12.0
2	罗麟洁	泸州医学院附属医院呼吸科	5	13	3.0	3.0
3	房洁	泸州医学院附属医院呼吸科	4	7	2.0	2.0
4	张洁	泸州医学院附属医院呼吸科	6	81	3.0	6.0
5	徐丽娜	辽宁省本溪市中心医院呼吸内科	7	41	4.0	6.0