摘要:
目的 研究用苯甲基磺酰氟(PMSF)预处理对有机磷化合物诱导的迟发性神经病(OPIDN)母鸡脊髓中神经丝(NFs)动态变化的影响,探索OPIDN发生的可能机制,方法成年母鸡随机分为正常对照组、磷酸三邻甲苯酯(TOCP)组和PMSF+TOCP组,每组32只,PMSF+TOCP组的动物提前给予皮下注射60ms/ksPMSF,24 h后给予TOCP组和PMSF+TOCP组动物一次性经口灌胃750mykg TOCP,对照组给予等体积生理盐水.分别在TOCP染毒后1、5、10、21 d处死动物,取脊髓组织匀浆分离出上清和沉淀2种组分,利用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS.PAGE)和蛋白免疫印迹法(Westem-blotting)检测上清和沉淀中高相对分子质量神经丝蛋白(NF-H)、中相对分子质量神经丝蛋白(NF-M)、低相对分子质量神经丝蛋白(NF-L)的相对含量.结果 TOCP染毒组母鸡在21 d内均出现瘫痪,PMSF+TOCP组动物未出现明显的OPIDN表现,与正常对照相比,脊髓沉淀中3种NF亚单位的含量均表现为先降低后恢复,均在10 d达到最低,差异有统计学意义(P<0.01).上清中3种NF亚单位的变化趋势与沉淀中基本一致,均在染毒后10d时明显降低,到21 d时恢复到正常水平.其中,10 d时NF-L、NF-M和NF-H的含量降低幅度分别达到51%、86%和38%,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).PMSF预处理再染毒TOCP组母鸡在21 d内未出现瘫痪,且脊髓中NFs紊乱也明显减轻.与正常对照相比,脊髓样品匀浆离心后的沉淀中只有NF-M在21 d时增加了21%,差异有统计学意义(P<0.05);上清中只有NF-H和NF-M在21 d时增加了19%和35%,差异有统计学意义(P<0.05).结论 TOCP染毒母鸡出现OPIDN,脊髓组织中NFs含量发生紊乱.用PMSF预处理后能阻断OPIDN的发生,并且可明显地抑制脊髓中NFs含量的紊乱.